1 、切記空載(一定要將超聲變幅桿插入樣品后才能開(kāi)機(jī))。
2、變幅桿(超聲探頭)入水深度: 1.5Cm左右,液面高度有30mm以上,探頭要居中,不要貼壁。超聲波是垂直縱波,插入太深不容易形成對(duì)流,影響破碎效率。
3、超聲參數(shù)設(shè)置:設(shè)置鍵好儀器工作參數(shù),對(duì)于對(duì)溫度要求比較敏感的樣品(比如細(xì)菌)一般外面采用冰浴,實(shí)際溫度肯定是低于25度,蛋白核酸肯定不會(huì)變性。
1)時(shí)間:超聲時(shí)間每次不要超過(guò)5秒,間隙時(shí)間應(yīng)大于或等于超聲時(shí)間,以便于熱量散發(fā)。時(shí)間設(shè)定應(yīng)以超聲時(shí)間短,超聲次數(shù)多原則,可延長(zhǎng)超聲機(jī)子以及探頭的壽命。
2)超聲功率:不宜太大,以免樣品飛濺或起泡沫,如小于10ml樣品容量,功率應(yīng)在200w以內(nèi),選用2mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿選擇開(kāi)關(guān)打到相應(yīng)擋;10-200ml樣品容量的功率在200-400w,選用6mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋;200ml以上的樣品容量功率在300-600w之間,選用10mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋;(2MM的小探頭功率嚴(yán)禁超過(guò)350W)。
3) 容器選擇:有多少的樣品就選多大的燒杯,這樣也是有利樣品在超聲中對(duì)流,提高破碎效率。例如;20mL的處理量用20mL的燒杯。如100ml大腸桿菌樣品設(shè)置參數(shù):超聲5秒 /間隙5秒次數(shù)70次(總時(shí)間為10分鐘)。功率300W(僅供參考),500ML左右的量,功率開(kāi)到500W-800W左右
4、若樣品放在1.5ml的EP管里請(qǐng)一定要將EP管固定好,以防冰浴融化后液面下降導(dǎo)致空載
5、日常保養(yǎng):用完后用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲.
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