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液相色譜儀的快速發(fā)展及需要注意的事項

閱讀:19發(fā)布時間:2025-6-12

液相色譜儀是近年來發(fā)展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的快速分離分析技術。它既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應用范圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長,為推動該領域的進步和發(fā)展作出了巨大貢獻。
  液相色譜儀通常都被認為和大容量色譜柱和高流速有關聯的。然而并不是以設備的大小和系統(tǒng)消耗的流動相的多少來決定制備液相色譜,而是依據分離目的來決定。分析液相的目的是給一種組份進行定量和定性。制備液相的目的是對產品的單體進行提取和純化。與傳統(tǒng)的純化方法(如蒸餾、萃?。┍容^,制備液相是一種更有效的分離方法,因此被廣泛應用在樣品和產品的提取和純化上。隨著合成、植化、生化和制藥等領域對高純度組份的需求不斷增加,液相色譜儀應用的領域也在迅速的擴大發(fā)展。
  液相色譜儀采用,提供一個快速、效率的大規(guī)模分離系統(tǒng),由并聯泵和具有電子線路、1200條/mm凹面光柵光路系統(tǒng)的紫外-可見檢測器、全反控的工作站等組成。主要用于小型實驗室,天然產物分離、蛋白質純化與鑒定、有機合成產物分離純化、精細化學品剖析、新藥化合物篩、HPLC樣品前處理。
  液相色譜儀的注意事項:
  1.流動相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應該恢復到室溫后使用。
  2.不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。
  3.使用緩沖溶液時,做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。
  4.長時間不用儀器,應該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應該用有機相(如,甲醇等),因為,純水易長霉。
  5.每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。
  6.C18柱不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。
  7.堵塞導致壓力太大,按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,清洗方法:
 ?、僖援惐甲魅軇_洗;
 ?、诜旁诋惐贾虚g用超聲波清洗;
  ③用10%稀硝酸清洗;
  8.氣泡會致使壓力不穩(wěn),重現性差,所以在使用過程中要盡量避免產生氣泡。
  9.如果進液管內不進液體時,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。
  10.要注意柱子的pH值范圍,不得注射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。
  11.更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。
  以上知識僅供參考,希望對您有所幫助哦!

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